鲍鱼碱性磷酸酶的分离纯化和性质研究

被引:46
作者
廖金花
陈巧
林丽蓉
洪燕飞
陈清西
机构
[1] 厦门大学生命科学学院,厦门大学生命科学学院,厦门大学生命科学学院,厦门大学生命科学学院,厦门大学生命科学学院教育部细胞生物学与肿瘤细胞工程重点实验室,福建厦门,教育部细胞生物学与肿瘤细胞工程重点实验室,福建厦门,教育部细胞生物学与肿瘤细胞工程重点实验室,福建厦门,教育部细胞生物学与肿瘤细胞工程重点实验室,福建厦门,教育部细胞生物学与肿瘤细胞工程重点实验室福建厦门
基金
教育部留学回国人员科研启动基金;
关键词
杂色鲍; 碱性磷酸酶; 分离纯化; 酶活性; 稳定性; 金属离子;
D O I
暂无
中图分类号
Q55 [酶];
学科分类号
071010 ; 081704 ;
摘要
以杂色鲍(Haliotis diversicolor)内脏为原料,经Tris HCl缓冲液(pH 7.5,含0.1mol/L NaCl)抽提,正丁醇处理,硫酸铵分级沉淀分离,DE 32离子交换、Sephadex G 150分子筛、DE 32纯化,得到电泳单一纯的碱性磷酸酶制剂,比活力为1 226 U/mg.酶学性质和动力学性质研究表明:该酶催化对硝基苯磷酸水解反应的最适 pH值为 10.08,最适温度为48℃.米氏常数Km 值为0.80 mmol/L,Vm 值为20.1 mmol/L·min-1(pH 10.0,37℃).酶的热稳定性研究表明:该酶在pH 7~11区间和在温度低于55℃下稳定.金属离子对酶活力的影响结果表明:Li+、Na+和K+对酶活力没有影响,Mg2+、Ca2+、Ba2+、Mn2+和Co2+对酶有不同程度的激活作用,而Cu2+、Cd2+、Zn2+、Hg2+、Ag+、Bi2+和Pb2+等对酶起抑制作用.
引用
收藏
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页数:4
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