共 2 条
绿色荧光蛋白转基因小鼠骨髓间充质干细胞的体外培养和鉴定
被引:3
作者:
段晴月
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董金山
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金超威
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文军
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郝靖惠
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林媛
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陆群
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机构:
[1] 第四军医大学口腔医学院牙体牙髓科
[2] 广州军区广州总医院口腔科
来源:
关键词:
绿色荧光小鼠;
骨髓间充质干细胞;
干细胞龛;
D O I:
10.15956/j.cnki.chin.j.conserv.dent.2010.04.002
中图分类号:
R329 [人体组织学];
学科分类号:
100107 [人体解剖与组织胚胎学(人体解剖学、组织与胚胎学)];
摘要:
目的:为了追踪评价干细胞修复组织缺损时干细胞龛的分子作用机制,培养绿色荧光蛋白转基因小鼠的骨髓间充质干细胞,并对其进行鉴定和诱导分化。方法:取3-4周龄gfp小鼠股骨全骨髓,ACK裂解红细胞后采用贴壁法进行体外培养和传代,荧光显微镜下观察贴壁细胞荧光状态。运用流式细胞术检测干细胞标记物,通过体外诱导观察其成骨成脂能力。结果:原代培养的Gfp骨髓间充质干细胞,能多次传代,细胞的荧光仍保持原有状态,未发生淬灭。流式细胞术鉴定CD29、CD90表达阳性,CD45表达阴性。成骨诱导3周后骨髓间充质干细胞分化为成骨细胞,茜素红S染色有橘红色磷酸盐胞外基质沉积并保持原有的荧光强度;成脂诱导2周后,细胞形态增大,油红O染色可见胞质内大量橙红色脂肪空泡,分化的细胞仍保持原有的荧光强度。结论:贴壁培养的Gfp骨髓间充质干细胞不仅荧光表达稳定,而且具有干细胞自我更新增殖和多向分化的干细胞特性,可以做为研究干细胞龛的优质示踪干细胞源。
引用
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页码:196 / 199
页数:4
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