具双价基因的甘蓝型油菜游离小孢子的遗传转化

被引：11

作者：

王新发

王汉中

刘贵华

胡赞民

郑元本

机构：

[1] 中国农业科学院油料作物研究所

[2] 中国科学院遗传与发育生物学研究所

来源：

农业生物技术学报 | 2004年 / 02期

关键词：

甘蓝型油菜; 小孢子培养; 几丁质酶基因和β-1,3-葡聚糖酶基因; 根癌农杆菌介导;

D O I：

暂无

中图分类号：

S565.4 [油菜籽（芸薹）];

学科分类号：

摘要：

以双低(低芥酶和低硫甙)甘蓝型油菜(Brassicanapus)游离小孢子为受体,通过根癌农杆菌(Agrobacteriumtumefaciens )介导,将几丁质酶基因和β-1,3-葡聚糖酶基因导入杂交油菜新品种油杂4号亲本恢复系和保持系中,成功地获得了转基因植株。在小孢子数与根癌农杆菌数接近时,100～200 mg/L羧苄青霉素能有效地抑制菌的生长,而不影响小孢子胚胎形成。用预培养2 d的小孢子与根癌农杆菌共培养10 h后离心,重新悬浮小孢子于含上述浓度的羧苄青霉素的NLN培养基中培养,获得了16株抗卡那霉素的恢复系的单倍体植株。经PCR及PCR-Southern blot检测,有10株呈阳性,证明外源基因已整合到油菜基因组中。

引用

页码：138 / 142

页数：5

共 7 条

[1] 导入β-1,3-葡聚糖酶及几丁质酶基因的转基因可育油菜及其抗菌核病的研究 [J].

蓝海燕 ;

王长海 ;

张丽华 ;

刘桂珍 ;

王岚兰 ;

陈正华 ;

田颖川 .

生物工程学报, 2000, (02) :26-30

[2] 表达β-1,3-葡聚糖酶及几丁质酶基因的转基因烟草及其抗真菌病的研究 [J].

蓝海燕 ;

张丽华 ;

王兰岚 ;

陈正华 ;

田颖川 ;

陈正华 ;

王长海 .

遗传学报, 2000, (01) :70-77

[3] 用激光微束穿刺法转化甘蓝型油菜小孢子的研究 [J].

陈军 ;

王兰岚 ;

刘澄清 ;

方荣祥 ;

宋桂英 ;

徐正平 ;

刘桂珍 ;

张丽华 ;

陈正华 .

激光生物学报, 1998, (02) :24-28

[4]

Direct gene delivery into isolated microspores of rapeseed (Brassica napus L.) and the production of fertile transgenic plants[J] . H. Fukuoka,T. Ogawa,M. Matsuoka,Y. Ohkawa,H. Yano.Plant Cell Reports . 1998 (5)

[5] HAPLOID TRANSFORMATION IN BRASSICA-NAPUS USING AN OCTOPINE-PRODUCING STRAIN OF AGROBACTERIUM-TUMEFACIENS [J].

SWANSON, EB ;

ERICKSON, LR .

THEORETICAL AND APPLIED GENETICS, 1989, 78 (06) :831-835

[6] SUCCESSFUL COCULTIVATION OF BRASSICA-NAPUS MICROSPORES AND PROEMBRYOS WITH AGROBACTERIUM [J].

PECHAN, PM .

PLANT CELL REPORTS, 1989, 8 (07) :387-390

[7] TRANSGENIC RAPESEED PLANTS OBTAINED BY THE MICROINJECTION OF DNA INTO MICROSPORE-DERIVED EMBRYOIDS [J].

NEUHAUS, G ;

SPANGENBERG, G ;

SCHEID, OM ;

SCHWEIGER, HG .

THEORETICAL AND APPLIED GENETICS, 1987, 75 (01) :30-36

← 1 →