bcl-2核酶(Ribozyme)促进紫杉醇诱导的细胞凋亡

被引:10
作者
彭玮丹
张杰
赵永同
惠宏襄
朱峰
杨安钢
王成济
机构
[1] 第四军医大学生物化学与分子生物学教研室!西安,第四军医大学生物化学与分子生物学教研室!西安,第四军医大学生物化学与分子生物学教研室!西安,第四军医大学生物化学与分子生物学教研室!西安,第四军医大学生物化学与分子生物学教研室!西安,第四
关键词
Bcl-2; 核酶(ribozyme); 紫杉醇; 耐药;
D O I
10.13865/j.cnki.cjbmb.2000.02.025
中图分类号
R730.5 [肿瘤治疗学];
学科分类号
100214 [肿瘤学];
摘要
用核酶技术阻断或降低抗凋亡蛋白 Bcl- 2的表达以促进化疗药物紫杉醇诱导的食管癌细胞凋亡 ,探索克服耐药、提高紫杉醇疗效的新途径 .将特异性切割 Bcl- 2 m RNA的核酶克隆至含MTII启动子并可为 Zn SO4 诱导表达的真核表达载体中 ,通过脂质体转入食管癌鳞状上皮细胞系Eca 1 0 9中 ,经 G41 8筛选得到稳定抗性细胞株 X1 0 9R,挑取单细胞株扩大培养 ,1 40μmol/L Zn SO4诱导 3d,用 Northern- blot、免疫荧光、流式细胞仪鉴定核酶及 Bcl- 2蛋白表达情况 ,用 TUNEL标记及流式细胞术检测凋亡细胞的比例 .bcl- 2核酶在不同单细胞株中有不同程度的表达 ,其中一株X1 0 9R1 4表达最高 .测定其中 Bcl- 2蛋白含量 ,发现 Bcl- 2蛋白表达大为降低 .加入紫杉醇后 ,TUNEL标记及凋亡峰测定结果都表明同一条件下凋亡率升高 .结果提示 ,转入特异性切割 bcl- 2m RNA的核酶可有效地阻断 Bcl- 2蛋白合成 .Bcl- 2蛋白表达降低可明显促进紫杉醇诱导的细胞凋亡 .说明 Bcl- 2蛋白在细胞产生耐药过程中起着重要作用
引用
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