水稻悬浮细胞的超低温保存研究

被引：14

作者：

严庆丰

王君晖

黄纯农

颜秋生

张雪琴

机构：

[1] 杭州大学生物科学与技术系,杭州大学生物科学与技术系,杭州大学生物科学与技术系,中国水稻研究所,中国水稻研究所杭州浙江大学生物医学工程研究所博士生,杭州,杭州,杭州,杭州,杭州

来源：

实验生物学报 | 1994年 / 04期

基金：

浙江省自然科学基金;

关键词：

水稻; 悬浮细胞; 超低温保存; 二步冷冻法;

D O I：

暂无

中图分类号：

S511 [稻];

学科分类号：

090104 [作物信息科学与技术];

摘要：

本研究分析了水稻悬浮细胞的生理状态和各种冷冻前处理等因素对超低温保存后细胞存活率的影响。结果表明,继代后培养3—5天,处于对数生长期的细胞,采用二步冷冻法,超低温保存后存活率最高。电镜超微结构观察显示,0.5mol/L山梨醇预培养,10%DMSO+0.5mol/L山梨醇复合保护剂处理,液泡显著变小,数目明显减少,从而降低了细胞内自由水含量,增强细胞的抗冷冻能力。在上述合适的前处理和冷冻-化冻条件下,超低温保存水稻悬浮细胞的恢复生长率为58%,恢复生长的细胞转移到分化培养基上,可再生健壮绿苗, 移植到盆钵,在温室中长成正常结实的植株。

引用

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