生技霉素是一组以4"-异成酰螺旋霉素为主的基因工程杂合抗生素,除了主要组分4"-异戊酚螺旋霉素Ⅲ、Ⅱ、Ⅰ(生技霉素A1、B1、E1)和小组分4"-了酰/异丁酞螺旋霉素Ⅲ(生技霉素A2a/A2β)以外,还含有其它4"-酸化螺旋霉素和少量杂质。采用连续逆流分配法,碱性硅胶柱层析,制备薄层层析和中压柱层析等分离方法,并以薄层层析和HPLC作为检测手段,从生技霉素混合物中分离得到了四个小组分A0、B2、B3和C2,其含量分别为0.5%、3.3%、6.2%和2.6%,其中B2为B2a和B2β两个异构体的混合物。经过UV、IR、SI-MS、GC-MS、1H-NMR、13C-NMR、1H-1H COSY等光谱分析,并与生技霉素 A1、B1、A2a、A2β等的光谱数据进行比较,确定了生技霉素B2a为4"-丁酰螺旋霉素Ⅱ,B2β为4"-异丁酰螺旋霉素Ⅱ,其中4"-异丁酰螺旋霉素Ⅱ为一个新的基因工程杂合抗生素。