茶树β-葡萄糖苷酶cDNA克隆和原核表达

被引:11
作者
李远华
江昌俊
杨顺利
余有本
机构
[1] 安徽农业大学农业部茶叶生物化学与生物技术重点开放实验室
关键词
茶树; β-葡萄糖苷酶; cDNA; 原核表达;
D O I
暂无
中图分类号
S571.1 [茶];
学科分类号
0902 ; 090203 ;
摘要
对与萜烯类香气前体及与抗病虫害有密切关系的茶树(Camellia sinensis)β-葡萄糖苷酶cDNA进行克隆和原核表达。结果表明,该酶cDNA全长序列为1 475 bp(GenBank登录号为AF537127),与其它植物同源性为40%~60%。α-螺旋构象14.33%、β-折叠构象25.43%,存在多个氨基酸功能结构域。利用pET-32a表达载体构建的重组质粒,转化到大肠杆菌(Escherichia coil)菌株BL21zztrxB(DE3)中,诱导产生63 kD的融合蛋白,表达产物具有正常的生物学活性,能催化葡萄糖苷键的水解反应;诱导表达结果显示,主要在细胞质中以可溶性蛋白形式进行表达。
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