一个新的用于植物转化的双元质粒载体的构建及应用

被引:4
作者
李旭刚
路子显
冯德江
朱祯
机构
[1] 中国科学院遗传研究所,中国科学院遗传研究所,中国科学院遗传研究所,中国科学院遗传研究所北京,北京,北京,北京
关键词
双元载体pCNP-Ⅱ; 农杆菌; β-葡糖醛酸酶; pBin19;
D O I
暂无
中图分类号
Q943.2 [植物基因工程];
学科分类号
摘要
构建了一个适合农杆菌介导转化的双元T-DNA载体.载体pCNPT-Ⅱ含有与LacZ相连的多克隆位点,其分子量比常用的pBin19载体小了2.6 kb.多克隆位点靠近T-DNA的右边界,植物选择标记基因新霉素磷酸转移酶基因靠近T-DNA的左边界,当T-DNA从右边界向左边界依次转移时,使外源基因应先于选择标记基因整合进植物基因组,可以避免产生无外源目的基因的转化植株.以β-葡糖醛酸酶基因作报道基因构建了植物表达载体pCNPT-HGUSA,经农杆菌介导转化了烟草.分子检测表明,在外源目的基因与选择标记基因共整合的频率上,pCNPT-Ⅱ构建的植物表达载体强于pBin19来源的pB1121.
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    [J]. 植物学报, 1998, (05) : 20 - 26
  • [3] Molecular Cloning: A Laboratory Manual. Sambrook J,Fritsch EF,Maniatis T. . 1989
  • [4] pBECKS2000: a novel plasmid series for the facile creation of complex binary vectors, which incorporates “clean-gene” facilities[J] . A. C. McCormac,M. C. Elliott,D.-F. Chen. &nbspMGG - Molecular and General Genetics . 1999 (2)
  • [5] Binary Agrobacterium vectors for plant transformation. Bevan M. Nucleic Acids Research . 1984
  • [6] Identification of a general silencer for 19S and 35S promoters in a transgenic tobacco plant: 90 by of homology in the promoter sequence are sufficient for trans-inactivation. Vaucheret H. Comptes Rendus de l Académie des Sciences . 1993
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