HPLC法测定补阳还五汤中主要成分及其代谢研究

目的:探索补阳还五汤的主要成分在体内的代谢途径。方法:采用HPLC法对补阳还五汤中主要成分(毛蕊异黄酮苷、刺芒柄花苷、芍药苷、毛蕊异黄酮和刺芒柄花素)的含量进行测定,通过体外孵育方法考察补阳还五汤中主要成分在肝匀浆、肠道菌液、人工胃液和人工肠液中不同时间点的含量变化,以相对浓度的改变来反映各化合物量的变化。硝苯地平用来验证孵育体系中CYP450酶的活性。采用Shimadzu VP-ODS分析柱(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,柱温30℃,以0.1%甲酸水溶液(A)-乙腈(B)为流动相,梯度洗脱,流速0.8 m L·min～(-1),UV检测器波长254 nm,二极管阵列检测器检测波长范围200～500 nm,进样量10μL。结果:补阳还五汤中的5个主要成分在肝匀浆、肠道菌液、人工胃液和人工肠液中相对浓度均发生不同程度的改变,其中肝匀浆(毛蕊异黄酮含量增加超过500%)和肠道菌液(毛蕊异黄酮含量增加超过200%)孵育体系中相对浓度变化最为明显。结论:肠道菌群、消化道酶和肝药酶是补阳还五汤中主要成分的主要代谢因素,不同活性成分的主要代谢途径存在明显差异。