南农CY-1型细胞融合仪的研制及其应用

被引:2
作者
周静娴
姚国顺
吴琴生
刘大钧
机构
[1] 南京农业大学基础课系
[2] 南京农业大学农学系
关键词
小麦; 微生物; 原生质体; 小鼠细胞; 细胞融合; 电融合; 集成电路;
D O I
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中图分类号
学科分类号
摘要
南农CY-1型细胞融合仪的主线路全部由集成电路组成。它能在电融合小室的电极间产生一个交变电场(5kHz~2MHz,0~250V/cm),使动植物细胞排列成串,其输出的直流融合脉冲(脉宽10~150μs,0~300V)能成功地诱导相邻原生质体局部接触区质膜的可逆击穿而形成融合。用该仪器对小麦(T.aestivum)悬浮培养系和叶肉原生质体、微生物原生质体(水稻恶苗病菌)和动物细胞(小鼠骨髓瘤细胞与脾细胞)进行了融合试验.结果表明,在交变电场中,各种细胞成串率均达90%以上;在融合脉冲作用下,小麦原生质体融合率最高可达90%。用荧光双醋酸脂(FDA)测定活力,结果表明:两种小麦原生质体在2000V/cm 脉冲场强作用下,诱导融合后,成活率达80%~90%。
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