咖啡酸苯乙酯对鱼藤酮诱导帕金森细胞模型的保护

背景:咖啡酸苯乙酯可抑制大鼠脑损伤后的脂质过氧化和脑损伤,但是在帕金森细胞模型中,5-脂氧酶和白三烯的变化规律,以及咖啡酸苯乙酯是否通过抑制鱼藤酮诱导的5-脂氧酶和白三烯变化而发挥对帕金森样损伤的保护作用,仍有待进一步研究。目的:探讨咖啡酸苯乙酯对鱼藤酮诱导帕金森细胞模型的保护作用,同时观察5-脂氧酶是否参与帕金森细胞模型的损伤。方法:(1)取生长状态良好的PC12细胞,分5组培养,分别以0,0.01,0.1,1,10μmol/L鱼藤酮干预,24,48 h后,观察细胞形态及活性变化,选择最佳诱导帕金森细胞模型的鱼藤酮浓度;24 h后,Western法检测5-脂氧酶表达,ELISA法检测半胱氨酰白三烯生成释放量;(2)取生长状态良好的PC12细胞,分6组培养,以正常培养的细胞为空白对照,其余5分别加入0,0.01,0.1,1,10μmol/L咖啡酸苯乙酯预处理30 min,之后加入1μmol/L鱼藤酮,24 h后,检测细胞活性,ELISA法检测半胱氨酰白三烯生成释放量。结果与结论:(1)0.1-10μmol/L鱼藤酮可诱导PC12细胞损伤,1μmol/L鱼藤酮处理24 h后的细胞形态和细胞存活率变化适度明显,所以选择该条件作为鱼藤酮诱导PC12细胞帕金森样损伤的细胞模型;(2)鱼藤酮呈浓度依赖性增加5-脂氧酶的表达与半胱氨酰白三烯的生成释放;(3)1-10μmol/L咖啡酸苯乙酯可降低鱼藤酮诱导的PC12细胞半胱氨酰白三烯生成释放量增加,呈浓度依赖性抑制鱼藤酮诱导的PC12细胞存活率降低;(4)结果表明,5-脂氧酶参与鱼藤酮诱导帕金森细胞模型的损伤作用,咖啡酸苯乙酯对鱼藤酮诱导帕金森细胞模型的损伤有明显保护作用。