激光打孔技术用于冷冻精子复苏后体外受精的研究

目的 比较精子冷冻前后体外受精率的变化，以及卵子经过激光打孔后，与新鲜精子及冷冻复苏精子体外受精，比较受精率的变化。方法 冷冻2个近交系小鼠和5个品系的基因工程小鼠的精子，比较新鲜精子和冷冻复苏精子与C57BL/6J小鼠卵子做体外受精的结果;然后对C57BL/6J卵子做激光打孔，再与新鲜及冷冻复苏精子体外受精结果进行比较。结果 (1)新鲜C57BL/6J精子受精率为50.4%,C57BL/6N的受精率为48.6%，远高于冷冻精子复苏后的受精率(17.7%和15.4%);卵子打孔后，再与C57BL/6J及C57BL/6N的新鲜精子或冷冻复苏精子受精，受精率分别为64.6%,59.7%和60.4%,48.3%，冷冻精子复苏后的体外受精率提高显著;(2)5个基因工程小鼠新鲜精子和冷冻精子复苏后与C57BL/6J卵子的受精率分别为:91.5%vs 28.6%, 77.4%vs 52.3%,40.7%vs 12.7%,56.5%vs 14.6%,65%vs 6.5%;这5个品系的小鼠新鲜精子和冷冻精子复苏后与C57BL/6J打孔卵子的受精率分别为75%vs 50.8%,74.3%vs 35.6%,75.7%vs32.7%,79.5%vs 48.9%,59.5%vs 46.3%，冷冻精子复苏后的受精率较之不打孔卵子，提高显著。结论 激光打孔技术用于冷冻复苏精子的辅助体外受精，可以显著提高冷冻精子复苏后的受精率，使得精子保种更加经济有效。