G418抗性HEK293细胞的培育

被引:9
作者
吕茂民
贾莉玮
王建国
杨姝
熊景峰
章金刚
机构
[1] 军事医学科学院输血医学研究所
基金
北京市自然科学基金;
关键词
G418抗性; HEK293细胞; 猪内源性反转录病毒; 细胞模型;
D O I
暂无
中图分类号
S852 [兽医基础科学];
学科分类号
090601 ;
摘要
目的 培育具有G418抗性的HEK2 93细胞 ,用于建立猪内源性反转录病毒感染人HEK2 93细胞的模型。方法 通过脂质体转染的方法 ,将含有neo基因的质粒pIRESneo导入HEK2 93细胞中 ,利用G418的选择特性 ,对转染细胞进行压力筛选 ,并对其进行了PCR鉴定。结果 经 6 0 0 μg ml的G418压力筛选后 ,获得了抗性细胞克隆。抗性细胞的形态和生长速度与筛选前细胞没有差异 ,特异性核苷酸引物检测抗性细胞基因组DNA ,可以扩增出对应的核苷酸片段。结论 成功地培育了G418抗性HEK2 93细胞 ,为建立猪内源性反转录病毒感染人HEK2 93细胞的模型奠定了基础。
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共 2 条
  • [1] Infection by porcine endogenous retrovirus after islet xenotransplanation in SCID mice. Van der Laan LJ,Lockey C,Griffeth B,et al. Nature . 2000
  • [2] Molecular Cloning-a laboratory manual (second edition). Sambrook J,Fritsch EF,Maniatis T. . 1989