坛紫菜叶状体蛋白质双向电泳样品制备方法的比较

被引:1
作者
杭楠
谢潮添
陈昌生
纪德华
徐燕
机构
[1] 集美大学水产学院
关键词
坛紫菜; 蛋白质组; 双向电泳; 样品制备;
D O I
暂无
中图分类号
S917.3 [水产植物学];
学科分类号
0908 ;
摘要
蛋白质样品的制备是双向电泳分析的关键。为探索适用于坛紫菜叶状体蛋白质双向电泳样品的制备方法,实验对3种常用植物蛋白质分离方法进行了优化和改进,并分别同3种蛋白质裂解液联用,比较了9种方法的总蛋白质得率及双向电泳图谱效果。结果发现,采用三氯乙酸/丙酮沉淀法与裂解液C(7 mol/L尿素,2 mol/L硫脲,2%CHAPS,2%TritonX-100,2%IPG Buffer pH 3~10,65 mmol/L DTT)联用的方法,坛紫菜叶状体的蛋白质得率最高,且双向电泳图谱显示此法获得的蛋白质点数最多,蛋白点形状规则,水平和垂直拖尾情况较轻,图像清晰。实验结果还发现,在进行双向电泳分析时,采用pH 4~7的胶条可以使坛紫菜叶状体蛋白质得到更为有效的分离。
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