杂合抗菌肽CecAmil的改造及在毕赤酵母中的分泌表达

参照毕赤氏巴斯德酵母 （Pichiapastoris）偏好密码子 ,改造并化学合成杂合抗菌肽CecAmil基因 ,改造后的CecAmil基因克隆到pPICZαA载体中 ,构建分泌型重组酵母表达载体pPICZαACM ,转化Pichiapastoris受体菌X33。在醇氧化酶 （AOX）启动子调控下 ,分子量约 1 9kD的CecAmil杂合抗菌肽获得表达 ,经表达条件优化 ,重组酵母菌的摇瓶发酵产率可达到 2 4 5 μg mL。抗菌特性研究表明 ,该表达产物具有广谱抗菌活性 ,对多数G- 菌及G+ 菌均有较好的抑菌活性 ,特别是对氨苄青霉素抗性菌和卡那霉素抗性菌抑杀效果更好 ;具有热稳定性和酸稳定性。这些特点使得重组抗菌肽CecAmil在食品防腐、疾病防治和动物饲料添加剂等方面显露出很好的应用前景。