藏系绵羊乳酸脱氢酶A的分离纯化和酶学性质

被引:4
作者
司晓辉 [1 ]
赵兴波 [2 ]
郑玉才 [1 ]
文勇立 [1 ]
许湲 [1 ]
金素钰 [1 ]
杨雪 [1 ]
机构
[1] 西南民族大学生命科学与技术学院
[2] 中国农业大学生物学院农业生物技术国家重点实验室
关键词
藏系绵羊; 乳酸脱氢酶; 纯化; 亲和层析;
D O I
暂无
中图分类号
S826 [羊];
学科分类号
0905 ;
摘要
采用HiTrapTMBlueHP亲和层析和DEAE-Sephadex离子交换层析分离方法,对1只雄性高原藏系绵羊(Ovisaries)大腿骨骼肌乳酸脱氢酶-A(LDH-A)进行了分离纯化,并对其酶学参数进行了测定。纯化的藏系绵羊乳酸脱氢酶-A比活力为100.94U/mg蛋白,纯化倍数为12.0。经PAGE和SDS-PAGE分析均显示1条带。酶动力学参数测定显示:Km(米氏常数)NADH(reducednicotinamideadeninedenucleotide)=0.022,Km丙酮酸钠=0.444,均比家兔的高;丙酮酸还原反应的最适pH约为5.8;草#$%&’()*LDH-A的活力;二价汞是LDH-A的可逆性抑制剂。
引用
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页数:5
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