鸡蛋主要过敏原Gal d1片段基因的克隆、表达、纯化及免疫学鉴定

被引：6

作者：

马艳梅 ^{[1
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黄钟 ^{[1
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刘志刚 ^{[2
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闫浩 ^{[2
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王和平 ^{[3
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罗新萍 ^{[1
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孔小丽 ^{[1
]}

机构：

[1] 深圳大学医学院

[2] 深圳大学医学院呼吸疾病国家重点实验室深圳大学变态反应分室

[3] 深圳市儿童医院内五科

来源：

免疫学杂志 | 2010年 / 07期

关键词：

鸡蛋过敏原; Gald1; 克隆; 表达;

D O I：

10.13431/j.cnki.immunol.j.20100138

中图分类号：

R392.11 [免疫分子生物学（免疫化学）];

学科分类号：

100102 ;

摘要：

目的克隆、表达和纯化鸡蛋主要过敏原Gald1区基因,并对其免疫学活性进行鉴定。方法用生物信息学方法对鸡蛋主要过敏原Gald1基因进行抗原表位预测,设计特异性引物,用PCR的方法分别扩增Gald1N端和C端基因,将其分别连接到原核表达载体PET32a上。重组质粒转入大肠杆菌,用IPTG诱导表达,通过镍亲和柱层析法纯化重组蛋白,最后用Western-blotting检测重组蛋白的免疫原性。结果表达的蛋白均以可溶性为主,N端融合蛋白相对分子质量为28600,C端融合蛋白相对分子质量为26800,纯化的N端和C端蛋白均有较好的免疫原性,C端的免疫原性强于N端。结论成功地克隆和表达了鸡蛋主要变应原基因Gald1的N端和C端,为鸡蛋过敏的诊断和免疫治疗奠定了基础。

引用

页码：589 / 593

页数：5

共 12 条

[1] 鸡蛋主要过敏原卵类粘蛋白基因的克隆及原核载体构建与表达 [J].