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用绿色荧光蛋白基因(gfp)标记产酸克雷伯氏菌SG-11研究其在水稻苗期根部的定殖
被引:13
作者:
吕泽勋
李久蒂
朱至清
机构:
[1] 中国科学院植物研究所!北京
来源:
关键词:
产酸克雷伯氏菌SG-11;
绿色荧光蛋白;
定殖;
激光共聚焦显微镜;
D O I:
暂无
中图分类号:
Q946 [植物生物化学];
学科分类号:
摘要:
本研究以自水稻根面分离的产酸克雷伯氏菌 SG-11为出发菌株,分别用携带gfp和nifH-gfp的质粒转化 SG-11进行基因标记,得到了转化子SG-11A和SG-11B。对两转化子的生长曲线和质粒稳定性进行了测定,在LB培养基中,SG-11的倍增时间为0.815h,对数期是3.20~5.28h,样品各点与其曲线的相关系数R2=0.9975;SG-11A的倍增时间为1.02h,对数期是 3.27~5.37 h, R2=0.9987,在无选择压力的条件下,连续传 80代时质粒的保存率为 0%。在Kp培养基中, SG-11的倍增时间为1.159h,对数期是2.50~4.92h,相关系数R2=0.9922;SG-11B的倍增时间为1.163h,对数期是2.50~4.92h,相关系数R2=0.9698,连续转100代时质粒的保存率为65.6%。激光共聚焦显微镜观察结果表明:在试管限菌培养条件下,SG-11A主要定殖在水稻根部的伸长区和根毛区,并且在次生根形成处有菌团存在,在水稻根通气组织的细胞间隙和维管束导管内发现了SG-11A,在根的伸长区只是偶尔观察到了表达nifH-gfp的SG-11B。砂培条件下,在水稻根伸长区观察
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