荧光定量聚合酶链反应检测乙型肝炎病毒

目的用荧光定量聚合酶链反应（ＦＱ ＰＣＲ）方法准确地定量检测血清中乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）的数量和免疫指标，以指导临床。方法设计合成了ＨＢＶＦＱ ＰＣＲ诊断试剂盒，以一种完全闭管式的ＰＣＲ和荧光探针杂交技术相结合所产生的实时检测定量ＰＣＲ方法，检测了５３２份临床血清标本。结果经ＦＱ ＰＣＲ检测，１５８份ＨＢＶ的ｓ抗原、ｅ抗原、ｃ抗体（ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ、ＨＢｃＡｂ）都阳性的标本，其血清标本ＨＢＶＤＮＡ也全部阳性，平均ＨＢＶＤＮＡ拷贝数为１．１×１０８／ｍｌ；９８例ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｂ、ＨＢｃＡｂ都阳性的标本，其阳性率为７３％（７１例），平均拷贝数为８．６×１０５／ｍｌ，而常规ＰＣＲ只有３３％的阳性率；６７例ＨＢｓＡｂ、ＨＢｅＡｂ、ＨＢｃＡｂ都阳性标本的平均拷贝数为２．３×１０５／ｍｌ。结论能够避免ＰＣＲ后处理导致的假阳性污染，并实现准确定量。ＦＱ ＰＣＲ可以检测ＨＢＶ的真实感染和复制情况，对于乙型肝炎的临床诊断，治疗方案的选择和疗效考察有较大的指导意义。