影响农杆菌介导的柑桔基因转化因素研究

以柑桔（ Ｃｉｔｒｕｓ） 中的枳壳、甜橙、柠檬、四季桔上胚轴为对象， 进行了农杆菌介导的柑桔衰退病病毒外壳蛋白基因转化影响因素研究， 最终将衰退病病毒外壳蛋白基因转入枳壳。研究结果表明： 以卡那霉素为选择试剂， 且外植体水平放置时， 枳壳的选择浓度为５０μｇ／ｍＬ， 其它品种为２０ ～３０μｇ／ｍＬ。外植体与农杆菌的共培养时间３ ｄ 最好， ７０ ～１００μｍｏｌ／Ｌ的酚类化合物（Ａｓ） 的添加对外植体Ｇｕｓ 瞬时表达阳性率有明显促进作用。转化所用外植体年龄以２０ ｄ 最好， 品种之间抗性芽产生率与Ｇｕｓ 阳性芽产生率明显不同。以质粒ＤＮＡＮｃｏⅠ酶切产物为探针， 进行了Ｓｏｕｔｈｅｒｎ ｂｌｏｔ 分析， 结果表明外源基因已稳定整合到了枳壳植株的核基因组中。