残留尿苷酶对HCV cDNA破坏作用的研究

被引：4

作者：

杜绍财

季颖

朱凌

机构：

[1] 北京医科大学第二临床肝病研究所北京肝炎试剂研制中心!北京

来源：

中国医师杂志 | 2000年 / 12期

关键词：

尿苷酶; 聚合酶链反应; 脱氧尿嘧啶核苷三磷酸;

D O I：

暂无

中图分类号：

R446 [实验室诊断];

学科分类号：

摘要：

为了解残留尿苷酶对dUTP掺入cDNAPCR产物的破坏作用。采用PAGE和DNA -EIA杂交技术检测抗污染效果和DNA杂交百分率。结果表明⑴每反应 0 2单位尿苷酶 37℃ 2 0min可获得良好的抗污染效果。⑵ 94℃ 10min可灭活尿苷酶的活性。对照组PCR产物室温放置 65h杂交效率为 94 18%。试验组 - 2 0℃保存 65h杂交效率为 87 69%、77 2 4 %、76 83% ,室温 65h杂交效率为 74 77%、72 50 %、70 2 9% ,对照组与试验组间比较差异有显著性 (P <0 0 5)。试验组间比较差异无显著性 (P >0 0 5)。以上结果证实对照组室温放置 65h杂交效率下降 5 82 % ,试验组 - 2 0℃保存下降 19 4 1% ,放置 65h下降 2 7 4 8% ,可能与残留尿苷酶有关。

引用

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