采用单碱基突变模板作为内对照对组织中mRNA水平进行PCR定量

被引:16
作者
陆利民
李海雁
江蓉
姚泰
机构
[1] 上海医科大学生理学教研室!医学神经生物学国家重点实验室,上海,,上海医科大学生理学教研室!医学神经生物学国家重点实验室,上海,,上海医科大学生理学教研室!医学神经生物学国家重点实验室,上海,,上海医科大学生理学教研室!医学神经生物学国家重点实验室,上
关键词
定量; PCR; 基因突变; 血管升压素; V1受体;
D O I
暂无
中图分类号
R394 [医学遗传学];
学科分类号
100233 [医学遗传学];
摘要
用PCR方法对原始模板进行单碱基突变,在原始模板DNA的特定位点引入一个EcoRI酶切位点。单碱基突变的DNA经PCR扩增后定量、稀释,作为内标加入到样品中与待测DNA同时进行PCR扩增.扩增产物经酶切后电泳,根据电泳结果中不同分子量DNA片段的含量,对样品中待测基因拷贝数进行定量分析。实验结果观察到:每1μg肝脏组织总RNA经逆转录后AVPV1受体cDNA拷贝数约1.25×10-20mol。
引用
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页数:6
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共 3 条
[1]
血管紧张素Ⅱ对大鼠下丘脑内血管升压素基因转录的影响 [J].
陆利民 ;
宋后燕 ;
姚泰 .
生理学报, 1995, (04)
[2]
现代分子生物学实验技术.[M].卢圣栋主编;.中国协和医科大学出版社.1999,
[3]
分子克隆实验指南.[M].(美)J.萨姆布鲁克(J.Sambrook)等著;金冬雁等译;.科学出版社.1992,