抗心型脂肪酸结合蛋白单克隆抗体制备、鉴定和在侧向免疫层析方法中的应用

被引:3
作者
康可人 [1 ,2 ]
吴培钿 [2 ]
李悦琳 [2 ]
黄绮玲 [2 ]
李高辉 [2 ]
唐时幸 [2 ]
王继华 [2 ]
机构
[1] 华南理工大学生物科学与工程学院
[2] 自检型快速诊断国家地方联合工程实验室广州万孚生物技术股份有限公司
关键词
H-FABP; 单克隆抗体; POCT; 免疫层析;
D O I
10.13523/j.cb.20130112
中图分类号
R392 [医学免疫学];
学科分类号
100108 [医学免疫学];
摘要
目的:制备抗心型脂肪酸结合蛋白(H-FABP)单克隆抗体(mAb),并建立侧向免疫层析方法检测血浆中H-FABP。方法:用H-FABP蛋白免疫纯系Balb/c小鼠,采用杂交瘤技术建立能稳定分泌抗人H-FABP的单克隆杂交瘤细胞株。常规制备腹水,纯化后得到特异性抗H-FABP单克隆抗体,进行效价、特异性、亲和力的鉴定分析,并在ELISA平台进行抗体配对,用所筛选到的抗体对初步建立了检测H-FABP的侧向免疫层析方法。结果:成功获得12株稳定分泌抗体的阳性细胞株,并筛选出能相互配对,并应用于侧向免疫层析平台的抗体3D1和5F4,检测临床样品与对照试剂比较总符合率为100%。结论:筛选能稳定分泌抗体的细胞株,配对抗体应用于侧向免疫层析检测方法中,能快速、特异、灵敏的检测出临床样品中H-FABP,为临床应用快速检测H-FABP指标提供了方法和关键材料。
引用
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[1]
Impaired long-chain fatty acid utilization by cardiac myocytes isolated from mice lacking the heart-type fatty acid binding protein gene [J].
Schaap, FG ;
Binas, B ;
Danneberg, H ;
van der Vusse, GJ ;
Glatz, JFC .
CIRCULATION RESEARCH, 1999, 85 (04) :329-337
[2]
MONOCLONAL-ANTIBODIES TO HUMAN HEART FATTY-ACID-BINDING PROTEIN [J].
ROOS, W ;
EYMANN, E ;
SYMANNEK, M ;
DUPPENTHALER, J ;
WODZIG, KWH ;
PELSERS, M ;
GLATZ, JFC .
JOURNAL OF IMMUNOLOGICAL METHODS, 1995, 183 (01) :149-153