目的 寻找一种效果更好的冻存液 ,进一步提高冻存肝细胞的活率和活性。方法 用体重 5~ 8kg健康杂种乳猪作为肝细胞供体 ,用胶原酶原位灌注法分离肝细胞 ,将肝细胞分别以三种不同的冻存液 (二甲基亚砜、二甲基亚砜 +羟乙基淀粉、二甲基亚砜 +羟乙基淀粉 +1.3mmol/ L氯化钙 )在液氮中冷冻保存 1个月。 1个月后快速复温肝细胞 ,做活率、活性和形态学检测 ,部分肝细胞在含 Ca2 +和不含 Ca2 +两种不同的培养液里培养 5 d,并观察其功能表达情况。结果 不同冻存液保存的猪肝细胞其活率、活性和形态学表现均有所不同 ,其中单用 DMSO(二甲基亚砜 )的冷冻液效果最差 ;其次是 HES(羟乙基淀粉 ) +DMSO组 ;HES+DMSO+1.3mmol/ L Cacl2 联合冷冻液效果最好。复温后在含 Ca2 +培养液里培养的肝细胞其活率和白蛋白浓度比不含 Ca2 +的明显要好。结论 HES+DMSO+1.3mmol/ L Cacl2 联合冷冻液显著提高了肝细胞的冻存质量