马钱子碱对体外软骨细胞凋亡线粒体途径的影响

目的:探讨中药马钱子主要成分马钱子碱(strychnine)影响体外SD大鼠软骨细胞凋亡的作用机制,为骨关节炎的临床用药提供理论依据。方法:将体外培养的SD大鼠软骨细胞分为5组,分别加入正常培养液、凋亡诱导剂(SNAP)、SNAP+高剂量马钱子碱、SNAP+中剂量马钱子碱、SNAP+低剂量马钱子碱混合培养。并于培养20h后,流式细胞仪检测软骨细胞早期、晚期凋亡率;免疫组化及Western免疫印迹法观察与细胞凋亡相关蛋白表达的变化。结果:马钱子碱可抑制软骨细胞凋亡,其凋亡率随马钱子碱剂量增大而降低;各剂量组早期凋亡率明显高于晚期凋亡率,与晚期凋亡率相比(P<0.05),差异有统计学意义。正常对照组胞浆内细胞色素C(cytochrome C,CytC)及Smac极少表达,SNAP诱导凋亡后,释放入胞浆的CytC及Smac表达明显增加,但随马钱子碱剂量的增大,其活性降低。结论:马钱子碱可抑制SNAP诱导的鼠软骨细胞凋亡,其保护软骨的作用可能是通过线粒体通路实现。