人脑内一含有ACP样结构域新基因的发现

被引：73

作者：

邓艳春

药立波

刘新平

聂晓燕

王吉村

张晓光

苏成芝

机构：

[1] 第四军医大学生物化学与分子生物学教研室!西安

[2] 第四

来源：

生物化学与生物物理进展 | 2001年 / 01期

关键词：

基因; 脑; 乙酰基载体蛋白结构域; 生物信息学;

D O I：

暂无

中图分类号：

Q75 [分子遗传学];

学科分类号：

071007 ;

摘要：

为寻找脑内新基因 ,以正常成人全脑cDNA为模板 ,采用锚定PCR方法进行扩增 ,将经琼脂糖DNA电泳鉴定获得的一约 12 0 0bp大小的特异性条带回收 ,并克隆入Teasy载体 .用 310GeneticAnalyzer进行自动测序 .所得序列进行生物信息学分析 :BLAST相似性分析结果证明所得序列为新序列 ,读框分析表明 ,该序列中存在一完整编码区 ,编码含 35 7个氨基酸的蛋白质 .ProDom软件分析发现其含有酰基携带蛋白 (ACP)样结构域 .随后 ,经 3′RACE法克隆到该基因的全长cDNA ,其全长为 2 0 2 4bp ,染色体定位在 14q11 2 ,含有 16个外显子 ,15个内含子 ,该基因已登录到GenBank .经设计编码区引物 ,从Teasy载体扩增出编码区后再克隆入pGEX 4T1表达载体 ,经异丙基硫代 D 乳糖苷 (IPTG)化学诱导表达 .其编码区克隆入 pGEX 4T1表达载体后 ,转入JM10 9宿主菌 ,经IPTG诱导已得到表达 .点杂交及RNA印迹表明 ,该基因在正常成人脑内广泛高表达 .

引用

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