RAPD技术鉴定无融合生殖型平邑甜茶的有性后代

无融合生殖型平邑甜茶（ＭａｌｕｓｈｕｐｅｈｅｎｓｉｓＲｅｈｄ．）实生苗木在形态上整齐一致，染色体倍性不一并具混倍现象，这就造成其杂交后代中有性杂种难以早期准确鉴定。ＲＡＰＤ技术能简便迅速地解决这一问题，且比形态学和细胞学方法准确度高。在平邑甜茶×扎矮７６（Ｍ．ｂａｃ－ｃａｔａＢｏｒｋｈ）的杂交后代中绝大部分属于母本基因型，杂种比率仅占８％左右。其中一半杂种为皱叶型杂种，易于通过皱叶性状鉴别出来，另一半属普通型杂种，拟通过ＲＡＰＤ技术鉴别。实验中共筛选了８０个随机引物，获得一对共显性标记ＯＰＢ０７－５００与ＯＰＢ０７－４５０和一个纯合显性标记ＯＰＨ０４－８００，用这两个标记中的任意一个（对）标记即可鉴定出全部的有性杂种。采用ＤＮＡ混样分析法，将待测株系的ＤＮＡ样品分组混合后进行ＲＡＰＤ－ＰＣＲ扩增，对含有父本特异标记的小组再分株进行鉴定，降低了实验成本。由于需通过ＲＡＰＤ标记鉴定的杂种仅占４％左右，故在分组中将４～６株待测后代分为一组，这样降低了实验次数，使实验费用减少了６０％左右。