人Leptin的基因克隆及其在大肠杆菌中的表达

被引：6

作者：

赵跃然

游力

贾玉华

高春义

田志刚

机构：

[1] 山东省肿瘤生物治疗研究中心!山东省医学科学院基础医学研究所,济南,山东省肿瘤生物治疗研究中心!山东省医学科学院基础医学研究所,济南,山东医科大学附属医院外科!济南,山东省肿瘤生物治疗研究中心!山东省医学科学院基础医学研究所,济南,山东省肿瘤生

来源：

中国生物化学与分子生物学报 | 2000年 / 06期

关键词：

Leptin; 克隆和序列分析; 表达; 大肠杆菌;

D O I：

10.13865/j.cnki.cjbmb.2000.06.008

中图分类号：

学科分类号：

摘要：

用 RT- PCR自脂肪细胞 RNA扩增人瘦素 (leptin)基因的 c DNA片段 (约 50 0 bp)并克隆至克隆载体 p SK(+) ,获得重组质粒 p SK- OB,DNA序列分析显示获得的 Leptin基因和文献报道一致 .用限制酶 Eco R 和 Bam H 从 p SK- OB切下并插入原核表达载体 p BV2 2 0的相应限制酶位点 ,转化大肠杆菌 DH5α.转化菌株经 42℃诱导 ,SDS- PAGE检测和 Western印迹鉴定 ,获得高水平重组人瘦素的表达菌株 ,其表达量达菌体总蛋白的 30 %以上 .

引用

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