等度反相高效液相色谱法测定茶多酚的ACE抑制活性

建立了等度反相高效液相色谱法(RP-HPLC)测定绿茶茶多酚对血管紧张素转化酶(ACE)抑制活性的检测方法。以马尿酰-组氨酰-亮氨酸(HHL)为ACE反应底物,反应所生成的马尿酸为测定指标,未加酶抑制剂的反应为空白对照。使用Intersil ODS-3色谱柱(4.6 mm i.d.×250 mm,5μm),柱温35℃,流动相为甲醇-超纯水(体积比35∶65,各含0.05%(v/v)三氟乙酸及0.1%(v/v)三乙胺),流速0.8 mL/min,检测波长228 nm。在马尿酸浓度为5-50μg/mL时,马尿酸浓度与其峰面积呈良好的线性关系(R2=0.9997),马尿酸的回收率为93.55%-101.19%,相对标准偏差(RSD)为2.95%。该方法适用于酚类物质对ACE抑制活性的体外测定,具有操作简便、检测快速、精密度和准确性高的特点。