跨膜Ca2＋梯差通过调节膜脂流动性影响Gs激活腺苷酸环化酶

将牛脑皮层激活型Ｇ－蛋白（Ｇｓ）和腺苷酸环化酶（ＡＣ）重建于大豆磷脂脂质体，形成具有或不具有１０００倍跨膜Ｃａ２＋梯差的四种脂酶体，研究了跨膜Ｃａ２＋梯差对Ｇｓ功能的影响及其与膜脂物理状态的关系。结果表明，在具有与生理条件相似的正向跨膜Ｃａ２＋梯差的脂酶体Ａ中，ＡＣ的基础活力和Ｇｓ对ＡＣ的激活活力均最大；而跨膜Ｃａ２＋梯差与生理条件相反时（脂酶体Ｄ），ＡＣ的基础活力和Ｇｓ对ＡＣ的激活作用最小。外加Ｃａ２＋载体Ａ２３１８７消除脂酶体两侧的Ｃａ２＋梯差可导致前者（脂酶体Ａ）Ｇｓ功能降低和后者（脂酶体Ｄ）Ｇｓ功能增强，使两者Ｇｓ功能恢复到无跨膜Ｃａ２＋梯差的脂酶体水平。用荧光探针ＤＰＨ标记上述四种大豆磷脂制备的磷酶体，以时间分辨纳秒荧光技术研究在不同跨膜Ｃａ２＋梯差条件下膜脂物理状态变化。四种脂酶体的荧光各向异性测量结果表明，具有正向跨膜Ｃａ２＋梯差的脂酶体Ａ的序参数（Ｓ＝０．３２８），微粘度（η＝０．６１ｐ）和旋转相关时间（τｒ＝２．４ｎｓｅｃ）均较具有反向Ｃａ２＋梯差的脂酶体Ｄ者（Ｓ＝０．３５２，η＝０．６４ｐτｒ＝２．５ｎｓｅｃ）小，即前者的膜脂流动性较后者增加。这可能提示，一个相似于生理条件的跨膜Ｃａ２＋