共 2 条
[1]
现代分子生物学[M]. - 高等教育出版社 , 朱玉贤, 2002
[2]
现代生物技术概论[M]. - 北京师范大学出版社 , 何忠效等编著, 1999
一种带增强子的原核高效表达载体的构建及初步应用
被引：37
作者：
罗文新
张军
杨海杰
李少伟
谢小燕
逄淑强
李少菁
夏宁邵
机构：
[1] 厦门大学细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室!厦门
[2] 厦门大学细胞生
来源：
关键词：
表达载体;
Ω序列;
T7启动子;
增强型绿色荧光蛋白;
D O I：
10.13345/j.cjb.2000.05.009
中图分类号：
Q789 [基因工程的应用];
学科分类号：
071007 ;
0836 ;
090102 ;
摘要：
构建的 pTO T7大肠杆菌高效融合表达载体 ,调控序列中有一个Ω序列和一个T7启动子串联 ;多克隆位点 (MCS)包括 8个常用酶切位点 ;可进行融合表达或者非融合表达 ,根据不同的需要加以选择 ;融合蛋白N端为T7g10的 12个起始氨基酸 ,C端为His标签 ;含kan抗性基因作为选择标记。将增强型绿色荧光蛋白 (EGFP)基因克隆至 pTO T7载体 ,在E .coli中的表达结果表明 ,融合EGFP达到菌体总蛋白量的 5 0 %以上 ,90 %以上的融合蛋白以可溶性形式存在 ,融合后的EGFP仍保持原有的荧光性质。与同时构建的不含Ω序列的 pT T7载体的表达产量的比较研究结果表明 ,Ω序列在 pTO T7载体中能显著提高表达效率。
引用
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页数：4
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