用于食源性疾病病原菌诊断的基因芯片研究及评价

目的:建立应用基因芯片结合酪胺信号放大法检测食源性疾病病原菌的方法。方法:针对细菌16S和23SrDNA基因设计各种病原菌诊断的特异性探针和通用引物。被检测的病原菌经过生物素标记的引物进行PCR扩增,然后与制备的基因芯片探针区杂交,再用酪胺-Cy3进行显色。最后通过荧光扫描仪扫描杂交图像。结果:建立的基因芯片检测方法用于诊断沙门菌、志贺菌、副溶血性弧菌、空肠弯曲菌、肠出血性大肠杆菌O157:H7、单增李斯特菌、霍乱弧菌、腊样芽孢杆菌等8种细菌性传染病病原菌。纯培养物的检测灵敏性达到5×102CFU/mL,对20例模拟双盲样本进行检测,结果与预期的完全相符。结论:本方法特异性强、灵敏度高,可以用于传染病防控和临床诊断等多个领域。