不同pH值的培养液对兔骨髓间充质干细胞体外培养的影响

目的　探讨不同pH值的低糖DMEM培养液对兔骨髓间充质干细胞 (MSCs)体外培养的影响 ,寻找最适宜MSCs生长的培养液的pH值。方法　采用常规的细胞培养传代技术以及光、电镜技术和细胞增殖活性的检查方法 ,观察不同pH值的低糖DMEM培养液对MSCs生长、增殖、形态的影响。结果　培养液的pH值在 7.2～ 7.4之间时 ,MSCs生长活跃 ,增殖速度极快 ,无接触抑制 ,镜下细胞呈单一梭形外观的成纤维细胞 ,形成成纤维细胞集落。pH值大于 7.4时 ,MSCs逐渐停止增殖 ,镜下细胞膜贴壁展开、边缘卷曲 ,细胞面积变大为正常的数倍 ,形态极不规则。pH值在 7.1～ 7.19之间时 ,变化不大 ,仅增殖速度稍减慢。pH值小于7.1时 ,MSCs生长增殖速度亦明显减慢 ,镜下细胞逐渐从培养瓶壁脱落 ,成为圆球形悬浮细胞。结论　MSCs对碱性的培养液较敏感 ,稍偏碱即影响生长增殖 ,对酸性的培养液则有一定的耐受。使用培养液前有条件也最好用pH计测定pH值 ,同时注意观察细胞生长增殖情况及培养瓶中培养液的颜色 ,以便及时换液