番茄随机扩增DNA多态性体系的条件优化

被引：4

作者：

孟凡娟

李景富

许向阳

机构：

[1] 东北农业大学园艺学院

[2] 东北农业大学园艺学院黑龙江哈尔滨

[3] 黑龙江哈尔滨

来源：

生物技术通讯 | 2005年 / 04期

关键词：

番茄; DNA提取; 随机扩增DNA多态性; 条件优化;

D O I：

暂无

中图分类号：

S641.2 [番茄（西红柿）];

学科分类号：

090202 ;

摘要：

利用改进的SDS法提取代号为03748的栽培番茄叶片基因组DNA。对影响番茄随机扩增DNA多态性(RAPD)扩增结果的因素进行了分析,确定了模板、Mg2+、dNTPs、引物和TaqDNA聚合酶的适宜浓度及反应的最佳循环次数。实验结果表明,在以下条件下,番茄的RAPD扩增效果较好:20μL反应体系中使用20～40ng的模板、1.5～2.0mmol/L的Mg2+、0.15～0.20μmol/L的dNTPs、0.15～2.0μmol/L的引物、1.0U的TaqDNA聚合酶;94℃预变性5min,然后经94℃变性1min、36℃1min、72℃1.5min,进行35个循环,最后在72℃时再延伸10min。

引用

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