清热凉血方药抑制c-Jun氨基末端激酶2丝裂原活化蛋白激酶信号通路并下调角质形成细胞人β防御素-2的研究

被引:9
作者
李锘 [1 ]
李红艳 [2 ]
鹿见香 [3 ]
徐波 [2 ]
曾伟贤 [4 ]
杨皓瑜 [5 ]
白彦萍 [1 ]
机构
[1] 北京中日友好医院皮肤科
[2] 中日友好医院临床医学研究所
[3] 沈阳市第七人民医院皮肤六科
[4] 广东省中医院珠海医院皮肤科
[5] 北京中医医院皮肤科
关键词
银屑病; MAP激酶信号系统; NF-κB; β防御素; 清热凉血方药;
D O I
10.16761/j.cnki.1000-4963.2016.09.003
中图分类号
R285 [中药药理学];
学科分类号
100806 [中药药理学];
摘要
目的:通过研究清热凉血中药对人永生化表皮细胞(Ha Ca T细胞)人β防御素(HBD)-2的表达及信号通路的调控作用,探讨其治疗银屑病的可能机制。方法:用白细胞介素(IL)-1β和肿瘤坏死因子(TNF)-α的混合物刺激Ha Ca T细胞建立信号通路活化及HBD-2高表达的Ha Ca T细胞模型;分别用清热凉血中药、维A酸和生理盐水进行干预,用实时荧光定量核酸扩增法(q PCR)和酶联免疫吸附试验(ELISA)测定清热凉血中药对细胞模型中HBD-2表达水平的影响;用免疫印迹法(westen blot)检测清热凉血中药对细胞模型中HBD-2及丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinases,MAPK)和核转录因子kappa B(NF-κB)信号通路的影响。结果:(1)中药血清高剂量组和维A酸血清组均可明显下调Ha Ca T细胞模型中HBD-2m RNA的表达,抑制率分别为66.8%和73.5%,与细胞模型组比较,差异均有统计学意义(均P<0.01),中药血清高剂量组和维A酸血清组比较差异无统计学意义(P>0.05);(2)中药血清高剂量组与维A酸血清组均可抑制细胞培养上清中HBD-2的分泌,与细胞模型组比较,抑制率分别为35.6%和61.6%;(3)100 mg/L的IL-1β和TNF-α混合物作用18 h后可使Ha Ca T细胞中的cJun氨基末端激酶(JNK)2 MAPK信号通路活化;清热凉血中药血清可以明显下调磷酸化c-Jun氨基末端激酶(p-JNK)2蛋白的相对含量,抑制JNK2 MAPK信号通路的活化。结论:清热凉血方药可明显下调HBD-2高表达的Ha Ca T细胞模型及培养上清中HBD-2的表达。清热凉血方药可以抑制JNK2 MAPK信号通路,并阻断IL-1β和TNF-α对HBD-2的激活。
引用
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