目的 观察不同代数软骨细胞及其在支架上的生物学特性 ,为软骨组织工程提供理想的种子细胞。方法 将 2周龄的新西兰大白兔软骨细胞置盖玻片上进行原代和传代培养 ,同时 ,把相应代数的软骨细胞种植于明胶海绵上 ,应用倒置显微镜和电镜观察不同代数细胞形态学变化和增殖能力 ,以及不同代数软骨细胞种植于支架后的生长和黏附情况 ,应用HE染色鉴别及免疫组化观察Ⅱ型胶原的分泌情况。结果 (1)软骨细胞在体外单层培养 ,传 5代后细胞形态由多角形变成梭形 ,逐渐丧失表型。 (2 )第 4代软骨细胞在单层培养时 ,增殖能力最强 ,分泌功能旺盛。 (3)传代细胞贴壁时间短于原代。 (4)第 4代软骨细胞种植于支架上形成软骨细胞 -支架复合体所需的时间最短 ,软骨细胞于海绵支架上的黏附最紧密。结论 软骨细胞在体外培养第 4代左右可以作为组织工程的最佳种子细胞 ,其形成的软骨细胞 -支架复合体的质量最佳、时间最短