来源于橄榄绿链霉菌A1的高比活木聚糖酶XYNB的高效表达及性质的比较分析

被引：9

作者：

何永志

姚斌

王亚茹

袁铁峥

罗会颖

史秀云

伍宁丰

范云六

机构：

[1] 中国农业科学院饲料研究所

来源：

微生物学报 | 2004年 / 03期

关键词：

高比活木聚糖酶; 高效表达; 毕赤酵母; 酶学性质;

D O I：

10.13343/j.cnki.wsxb.2004.03.016

中图分类号：

Q55 [酶];

学科分类号：

摘要：

高效表达高比活木聚糖酶是进一步提高木聚糖酶发酵效价、降低其生产成本的有效途径。将橄榄绿链霉菌 (Streptomycesolivaceoviridis)A1的高比活木聚糖酶成熟蛋白编码基因xynB克隆到毕赤酵母表达载体pPIC9中 ,转化毕赤酵母得到重组酵母 ,在重组酵母中木聚糖酶基因得到了高效分泌表达 ,且表达产物具有生物学活性。在 3L发酵罐中蛋白表达量约 1 4mg mL ,酶活性 (效价 )为 1 2 0 0IU mL。SDS PAGE分析表明 ,表达的木聚糖酶XYNBa为糖基化蛋白 ,分子量为 31kD ,经脱糖基化处理得到 2 1kD的XYNBb ,与橄榄绿链霉菌A1所产原酶XYNB大小一致。通过对XYNB、XYNBa及XYNBb酶学性质的比较发现 :三者在比活性、Vmax及热稳定性方面有较大差异。该酶对不同木聚糖的酶解产物的糖份分析表明 :酶解产物的主要成分为木二糖、木三糖和木四糖 ,占总糖含量的 95 %以上

引用

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页数：5

共 3 条

[1]

Constitutive expression of the Trichoderma reesei β-1,4-xylanase gene （xyn2） and the β-1,4-endoglucanase gene （egI） in Aspergillus niger in molasses and defined glucose media[J] . S. Rose,W. van Zyl.Applied Microbiology and Biotechnology . 2002 (4)

[2]

High-level expression of an endoxylanase gene from Bacillus sp. in Bacillus subtilis DB104 for the production of xylobiose from xylan[J] . K. J. Jeong,I. Y. Park,M. S. Kim,S. C. Kim.Applied Microbiology and Biotechnology . 1998 (1)

[3]

Expression of xylanase gene xynA from Streptomyces olivaceoviridis A1 in Escherichia coli and Pichia pastoris. Zhang H L, Yao B, Wang Y R, et al. Chinese Journal of Biotechnology . 2003

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