免疫磁珠与荧光定量PCR联合检测乳制品中阪崎肠杆菌的实验研究

被引:13
作者
杨柳 [1 ]
苏明权 [1 ]
马越云 [1 ]
焦刚 [2 ]
常亮 [1 ]
肖凤静 [1 ]
李明 [2 ]
彭年才 [2 ]
郝晓柯 [1 ]
机构
[1] 第四军医大学西京医院全军临床检验医学中心
[2] 西安天隆科技有限公司
关键词
阪崎肠杆菌; 荧光定量PCR; 免疫磁珠;
D O I
暂无
中图分类号
R155 [饮食卫生与食品检查];
学科分类号
摘要
[目的]建立一种免疫磁珠吸附-荧光定量PCR(IMB-FPCR)快速检测阪崎肠杆菌的方法,探讨在乳制品污染监测及食物中毒快速诊断中的应用。[方法]根据阪崎肠杆菌rpsU-dnaG基因序列设计引物和探针,采用基因重组技术构建用于金黄色色葡萄球菌检测的定量标准品,建立阪崎肠杆菌IMB-FPCR检测方法。[结果]成功构建了阪崎肠杆菌重组质粒标准品和阪崎肠杆菌IMB-FPCR方法。阪崎肠杆菌的免疫磁珠吸附试验显示磁珠对奶粉中的阪崎肠杆菌吸附率达77.7%。通过特异性、敏感性、稳定性和重复性验证,结果表明具有较好的特异性,最低检测限为10cfu/ml的菌细胞,并具有良好的稳定性和重复性。整个检测仅需时1d。[结论]IMB-FPCR简便快速、灵敏度高及特异性强,为准确检测乳制品中阪崎肠杆菌提供了一个新的途径,可广泛应用于食品卫生监管、商品检验检疫以及临床诊断等。
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页数:4
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中国食品卫生杂志, 2004, (06) :550-555
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国外医学(免疫学分册), 1998, (01) :51-53+57
[5]  
Development of an IMS–PCR assay for the detection of Mycobacterium avium ssp. paratuberculosis in water[J] . L.Whan,H.J.Ball,I.R.Grant,M.T.Rowe.Letters in Applied Microbiology . 2005 (4)
[6]  
Enterobacter sakazakii infections associated with the use of powdered infant formula.Tennessee,2001. I Himelright,E Harris,V Lorch,et al. The Journal Of the American Medical Association . 2002