松材线虫实时PCR检测技术

被引:20
作者
陈凤毛
叶建仁
吴小芹
机构
[1] 南京林业大学森林资源与环境学院
关键词
松材线虫; 实时PCR; 特异引物; 探针; 检测;
D O I
暂无
中图分类号
S763.1 [病害及其防治];
学科分类号
0904 ;
摘要
根据松材线虫核糖体DNA内部转录区设计了一对特异引物F11/R11与探针TaqMan-11,构成松材线虫实时PCR检测方法。采用该检测方法对分离自枯死松树体内的松材线虫、拟松材线虫、大核滑刃线虫、霍夫曼尼伞滑刃线虫和长尾属线虫进行检测。结果显示,所有松材线虫株系都能够检测到荧光信号,而拟松材线虫、大核滑刃线虫、霍夫曼尼伞滑刃线虫、长尾属线虫以及对照均没有检测到荧光信号。表明探针Taq-Man-11与引物组合对松材线虫具有很强的特异性。此外,利用检测方法,在10μL的反应体系中,最少可以检测到0.005pg的松材线虫DNA含量。实时PCR也可以成功地检测出单条松材线虫。
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