一种标记cDNA芯片探针的新方法

探讨mRNA长片段反转录PCR技术 (RT LDPCR)在cDNA芯片微量探针标记和信号放大中的应用。首先提取BEP2D细胞的总RNA ,然后用两种不同的方法进行标记 ,一种为RT LDPCR ,用荧光素Cy3 dCTP进行标记 ;另一种为传统的RNA反转录 ,用荧光素Cy5 dCTP进行标记。将两种方法标记好的探针等量混合后与含有 44 0个点 (4 4个基因 )的cDNA芯片同时杂交 ,发现二者具有很高的一致性 (0 .5 2 .0 )。由于RNA反转录法为cDNA芯片探针标记的传统方法 ,从而验证了RT LDPCR用于cDNA芯片探针标记的可行性。RT LDPCR具有对样品总RNA的需要量少和可对样品中信号进行放大的优点 ,特别适合于对材料来源受到限制的RNA进行标记。