大肠杆菌青霉素酰化酶的提纯及其性质的研究

大肠杆菌（Escherichia coli）AS1.76发酵液经有机溶剂处理,硫酸铵分级,再用聚丙烯酰胺垂直板凝胶电泳进行纯化,得到了聚丙烯酰胺凝胶电泳均一的青霉素酰化酶纯品。纯酶作用的最适温度为45—55℃,最适pH为7.0—7.7,在无NIPAB存在下,纯酶在45℃以下稳定,但在55℃保温一小时,酶活力残存33.58%,纯酶在pH5.0—8.0稳定。酶作用于重排酸的米氏常数为3.33×10-2g/ml。Ag+对酶有抑制作用。用聚丙烯酰胺薄层凝胶等电聚焦测定酶的等电点（pI）为6.7—6.8,用SDS凝胶电泳测酶的亚基分子量分别为14300和58900。纯酶具有水解苯甘氨酸甲酯盐酸盐的作用,反应两小时产生12.74mM苯甘氨酸。