人表皮生长因子(hEGF)基因在蓝藻中的表达

被引:14
作者
戴溦
施定基
张卉
钟晖
冉亮
彭国宏
甘人宝
陈素娟
连慕兰
机构
[1] 中国科学院植物研究所,中国科学院植物研究所,中国科学院植物研究所,解放军医院东亚免疫研究所,中国科学院植物研究所,中国科学院海洋研究所,中国科学院生物化学研究所,解放军医院东亚免疫研究所,北京师范大学生命科学学院北京,北京师范大学生命科学学院,北京
关键词
人表皮生长因子; 鱼腥藻Anabaenasp.PCC7120; 聚球藻Synechococcussp.PCC7002; 载体; 转基因蓝藻; 三亲接合转移;
D O I
暂无
中图分类号
Q943.2 [植物基因工程];
学科分类号
071007 ; 090102 ;
摘要
人表皮生长因子 (hEGF)是由 5 3个氨基酸组成的蛋白 ,在临床上内服与外敷可促进内外表皮细胞的生长。将人工合成的hEGF基因连接到质粒pRL489上 ,位于启动子psbA下游。验证连接成功后 ,用三亲接合转移方法将载体pRLhEGF导入聚球藻Synechococcussp .PCC 70 0 2和鱼腥藻Anabaenasp .PCC 712 0。由于pRLhEGF没有能在单细胞蓝藻中自主复制的复制子 ,通过筛选 ,hEGF在聚球藻 70 0 2中是整合到蓝藻染色体上进行表达的。用PCR扩增的方法在两种转基因藻中均检测到hEGF基因的存在。放射免疫分析证明 ,hEGF基因在两种转基因藻中均得到了表达。而且 ,在聚球藻 70 0 2中是采用分泌形式将表达产物分泌到培养液中
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