款冬花粗多糖体外诱导人白血病K562细胞的凋亡

被引:36
作者
张秀昌 [1 ]
刘华 [2 ]
刘玉玉 [3 ]
孙黎 [2 ]
田嘉铭 [2 ]
贾天军 [2 ]
机构
[1] 河北北方学院医学技术学院
[2] 河北北方学院实验中心
[3] 河北北方学院第一附属医院心电图室
关键词
款冬花; K562细胞; 凋亡;
D O I
暂无
中图分类号
R733.7 [白血病];
学科分类号
100214 [肿瘤学];
摘要
目的:观察款冬花粗多糖对体外培养人白血病K562细胞有无凋亡诱导作用。方法:实验于2006-06-25/2006-09-08在河北北方学院实验中心细胞生物学实验室、分子生物学实验室、药物研究实验室完成。①款冬花粗多糖的提取:称取已干燥粉粹的款冬花417.0g,加入1000mL体积分数0.85乙醇回流提取1h,滤过,滤渣加入1000mL三蒸水回流提取2h,过滤,滤渣再加入1000mL三蒸水回流提取2h,合并2次滤液,减压浓缩至适量,四倍体积无水乙醇醇沉,静置过夜,过滤,沉淀依次用无水乙醇、丙酮、石油醚洗涤,即得款冬花粗多糖。苯酚-硫酸法测定款冬花粗多糖含量以生药计算为122.9mg。制成102.5g/L粗多糖溶液。②人白血病K562细胞的生长抑制实验:体外培养的K562细胞经10,30,50,70,90mg/L的款冬花粗多糖作用48h后,通过Hoeehst33258染色在荧光显微镜下进行形态学观察、采用琼脂糖凝胶电泳及流式细胞术检测细胞凋亡。结果:①经款冬花粗多糖作用后,荧光显微镜下发现体外培养的K562细胞中出现核固缩、凋亡小体。②经不同质量浓度款冬花粗多糖处理的K562细胞DNA电泳均出现相差约200bp的DNA梯子状条带。③流式细胞仪检测发现,经不同质量浓度款冬花粗多糖处理的K562细胞,有凋亡峰。结论:款冬花粗多糖可诱导体外培养人白血病细胞K562凋亡。
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页码:2029 / 2031
页数:3
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