弗氏志贺菌2a T32株asd基因缺失突变体的构建

被引:28
作者
王恒樑
冯尔玲
林云
廖翔
苏国富
机构
[1] 北京生物工程研究所!北京
[2] 海军医学研究所!上海
关键词
志贺菌属; ctxB基因; asd缺失突变体; 突变; 染色体缺失;
D O I
暂无
中图分类号
R378 [病原细菌];
学科分类号
100103 [病原生物学];
摘要
构建痢疾弗氏志贺菌 2aT32的asd基因全缺失突变体。方法 :采用全菌PCR技术 ,从痢疾弗氏 2aT32株染色体扩增了asd基因及其上下游各约 50 0bp的染色体DNA序列 ,并将其克隆至 pUC18,测定其核苷酸序列 ,在体外用ctxB基因置换了asd基因 ,然后将其克隆至自杀载体pXL2 75。通过细菌交配和体内同源重组 ,用ctxB基因完全取代痢疾弗氏 2aT32株染色体上的asd基因。结果与结论 :构建成asd基因全缺失而稳定表达CtxB的T32突变株FWL0 1,为进一步用载体 /宿主平衡致死系统构建多价菌苗候选株打下了基础。
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