胆固醇酯转运蛋白的提纯和鉴定附视频

目的建立一种新的分离纯化人血清胆固醇酯转运蛋白（ＣＥＴＰ）的方法，为制备ＣＥＴＰ单克隆抗体和ＣＥＴＰ浓度测定提供物质基础。方法制备无脂血清，用Ｂｕｔｙｌ Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４ＦＦ、ＣＭ ＳｅｐｈａｒｏｓｅＦＦ和ＳｅｐｈａｃｒｙｌＳ ２００三步柱层析分离、纯化ＣＥＴＰ。结果纯化ＣＥＴＰ经ＳＤＳ ＰＡＧＥ电泳鉴定呈单一区带，分子量６５０００，蛋白质含量０３２５ｍｇ／ｍｌ，与国外和作者研制ＣＥＴＰ单抗的免疫斑点试验呈特异性反应，与纯化脂蛋白（ａ）、载脂蛋白（Ａｐｏ）Ａ１、ＡｐｏＢ、ＩｇＧ、ＩｇＡ、ＩｇＥ、Ｃ３、Ｃ４抗体无免疫反应。结论经三步柱层析获得了纯化ＣＥＴＰ，得率约２５％，活性每小时３０ｎｍｏｌ／μｇ。