黄瓜胚性细胞悬浮培养及其原生质体的植株再生

黄瓜子叶原生质体来源的胚性愈伤组织,在液体培养中形成胚性悬浮细胞系,已继代两年,仍保持胚胎发生能力。不同的 ABA 和蔗糖浓度对胚状体的生长发育和同步化有明显影响。1mg/l 的 ABA 和7—9%的蔗糖能显著地减少培养物的愈伤化,并同步地控制胚状体处于球形或球形后期。低浓度的蔗糖(1%)有利于胚状体的早熟萌发。继代3—5天的胚性悬浮细胞团酶解后,获得大量有活力的原生质体。原生质体在 DPDK 液滴或浅层培养、或褐藻酸钠包埋培养中活跃分裂,形成细胞团和球形胚,转至固体培养基上或将包埋培养物直接转入液体振荡培养,胚状体可不断增殖。胚状体在大量元素减半,不加外源激素的 MS 培养基上发育成小植株。