人关节软骨脱细胞基质制备实验(英文)

背景:对天然的细胞外基质进行处理,剔除其抗原成分,保留了组织结构的完整性,这种材料具有良好的生物相容性,能为细胞创造尽可能接近体内的培养环境,因此应是组织工程中细胞培养支架的首选。目的:制备人关节软骨脱细胞基质,为进一步研究关节软骨基质作为细胞外支架材料提供方法学资料。设计:以骨组织标本为实验对象,单一样本研究。单位:解放军总医院骨科研究所。材料:实验于2004-01/05在解放军总医院骨科研究所完成。材料来自因股骨颈头下型骨折行关节置换而切除的股骨头。方法:切取人关节软骨,剪裁成3.5mm×4.5mm×2.0mm大小共10块,冻干处理12h,采取化学去污剂TritonX-100及DNA酶和RNA酶等试剂制备脱细胞的人关节软骨。用苏木精-伊红、番红O及软骨蛋白聚糖免疫组化染色等方法进行关节软骨脱细胞定性检测。主要观察指标:脱细胞关节软骨的组织学观察以及软骨蛋白聚糖免疫组织化学染色结果。结果:①苏木精-伊红染色、番红O染色均显示细胞陷窝内已无细胞结构。②软骨蛋白聚糖免疫组织化学染色阳性,提示脱细胞关节软骨基质内仍存在软骨蛋白聚糖。结论:人关节软骨冻干后,经去污剂-酶等处理方法可脱去软骨的细胞成分,成功制备人关节软骨脱细胞基质。其中保留的软骨蛋白聚糖可能仍存在原有的耐压特性。