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化学致癌物DNP致人胚鼻咽上皮细胞转化相关基因的鉴定
被引：4
作者：
段朝军
关勇军
何春梅
李峰
肖志强
陈主初
机构：
[1] 中南大学湘雅医院医学实验中心,中南大学肿瘤研究所,中南大学肿瘤研究所,中南大学肿瘤研究所,中南大学湘雅医院医学实验中心,中南大学湘雅医院医学实验中心中国湖南长沙,中国湖南长沙,中国湖南长沙,中国湖南长沙,中国湖南长沙,中国湖南长沙
来源：
关键词：
二亚硝基哌嗪;
共转染;
转化基因或癌基因;
D O I：
10.16605/j.cnki.1007-7847.2005.01.018
中图分类号：
R739.63 [咽肿瘤];
学科分类号：
100213 [耳鼻咽喉科学];
摘要：
为了探讨DNP致癌的分子机理,鉴定出化学致癌物二亚硝基哌嗪(DNP)致人胚鼻咽上皮细胞转化相关的基因及其活化方式.采用DNA共转染、裸鼠致瘤性试验、Southern杂交、PCR测序和序列同源性比较分析等,对DNP转化的人胚鼻咽上皮细胞株HENE-DNP进行研究.经过两轮DNA共转染和裸鼠致瘤性实验,Southern杂交表明,裸鼠肿瘤DNA中均含有人特异性高度重复序列Alu.用人Ha-ras、Ki-ras及N-ras癌基因特异性引物对裸鼠肿瘤DNA进行PCR扩增,仅能扩增出人Ha-ras基因相应的片段.Southern杂交进一步证实,裸鼠肿瘤DNA中存在与人Ha-ras基因片段大小一致的杂交带.RT-PCR产物测序,并将测序结果与GenBank进行序列同源性比较分析,发现裸鼠肿瘤中人Ha-ras基因cDNA第26位密码子第2位碱基发生了T→C的转换,编码的氨基酸由亮氨酸相应地变换成丝氨酸.化学致癌物DNP致人胚鼻咽上皮细胞转化相关的基因是Ha-ras,原癌基因c-Ha-ras激活可能是DNP转化人胚鼻咽上皮细胞的分子机制之一.
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