水霉菌总DNA提取方法研究

被引：9

作者：

可小丽 ^{[1
]}

汪建国 ^{[1
]}

顾泽茂 ^{[2
]}

李明 ^{[1
]}

龚小宁 ^{[1
]}

机构：

[1] 中国科学院水生生物研究所

[2] 华中农业大学水产学院

来源：

水生生物学报 | 2008年 / 01期

关键词：

水霉菌; DNA提取; 溶菌酶; 十六烷基三甲基溴化铵(CTAB); 尿素; 十二烷基硫酸钠(SDS);

D O I：

暂无

中图分类号：

S941 [鱼病学];

学科分类号：

摘要：

本实验采用EP管反复冻融和研磨的破壁方式,利用溶菌酶法、CTAB法、改良CTAB法、尿素法、十二烷基硫酸钠(SDS)法等5种方法,分别对5种鱼类致病性水霉菌(寄生水霉、多子水霉、异株水霉及两未定种)的基因组DNA进行提取,并采用紫外分光光度计和ITS区基因(包括5.8SrDNA)PCR扩增对DNA进行了评价。紫外分光光度计检测结果表明,5种方法均可提取到水霉菌DNA,其中改良CTAB法提取的5种水霉菌的DNA产量和质量最高,A260/A280在1.79—1.82之间,浓度为45μg/mL;PCR检测结果表明,只有改良CTAB法提取的DNA全部扩增到明亮、整齐、无拖尾的特异性条带,其他几种方法均存在暗带或无带现象。因此,改良CTAB法可以作为水霉菌DNA提取以开展分子生物学研究的首选方法。

引用

页码：68 / 73

页数：6

共 20 条

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