人间充质干细胞体外扩增及生物学特性的研究

目的　探讨成人骨髓、胎儿骨髓和人脐血 3种不同来源的人类间充质干细胞 (MSC)体外扩增及其生物学特性。方法　观察 3种来源的MSC的生长、增殖和表面标志的表达 ,从而评价MSC的纯化、增殖能力及其免疫学特性。结果　 (1) 3种不同来源的人MSC的细胞形态、集落数、集落大小均无差异 ;但成人骨髓MSC在集落形成及集落交错融合时间上均早于胎儿骨髓和脐血MSC ;(2 )3种来源的人MSC传代培养增殖速度无差异 ,但脐血和胎儿MSC融合后无接触抑制 ,而成人骨髓MSC存在接触抑制 ;(3)来源于骨髓单个核细胞 (MNC) 8× 10 6或脐血MSC 2 5× 10 6的MSC ,经体外扩增 3代、5代和 10代后 ,细胞数分别为 10 7、10 8和 10 10 个 ;(4)MSC易纯化 ,P2代细胞均一性为 90 % ,P3代细胞均一性为 95 % ,P5代细胞均一性达到 99% ;(5 )不同来源的MSC表面重要标志 :CD2 9、CD44、CD59、CD90 、CD10 5、CD166表达均为阳性 ,其造血细胞表面标志 :CD11a、CD14 、CD3 3 、CD3 4 、CD2 8、CD45、CD117表达均为阴性 ,与移植免疫排斥发生密切相关的表面标志 :HLA DR、B7 1(CD80 )、B7 2 (CD86)、CD40 和CD40L均为阴性。 3种不同来源的人MSC表面标志 ,差异无显著性。 (6 )两种不同培养体系对人MSC的纯化扩增及生物学特性无影响。结论　 (1)不同来源